苯甲羟肟酸厂家告诉您苯甲羟肟酸的合成方法

　　苯甲羟肟酸厂家告诉您苯甲羟肟酸的合成方法

　　1.乙酯的制备取代不同基团的苯甲酸0.2mol，溶于100毫升乙醇中，加入10g催化剂和10毫升带水剂，回流4～8h(不同原料的回流时间不同)，减压蒸馏去除溶剂，获得黄色溶液，用Na2CO3将pH调整到碱性，然后用自己烷提取，蒸去自己烷得乙酯的粗制品。如果产品是液体，减压蒸馏粗制品，收集所需的蒸馏，获得纯制品;如果产品是固体，则通过过滤和洗涤获得纯制品。通过GC/MS分析，确定我们需要的化合物纯度为99%，产量为85%。

　　2.苯甲羟肟酸的制备将20gNaOH溶解在50ml30%乙醇中，将0.2mol盐酸羟胺溶解在50ml30%乙醇中，然后将两者混合搅拌2h，使NaOH与盐酸羟胺完全反应，然后冷却至0℃，过滤，在滤液中加入0.1mol乙酯，在50℃下放置4h，用稀H2SO4调整至pH为6.0，用浅粉色固体沉淀，用水-乙醇重结晶纯产品，产量为80%，产品经高效液相色谱分析，纯度为99.2%，通过分析熔点测量仪、付里叶变换红外光谱仪、核磁共振波谱仪、元素分析仪，确定了五种化合物的结构。

　　3.MTT实验

　　将合成的化合物用生理盐水制成母液，储存在-20℃冰箱中备用，每种化合物设置0.1、1.0、10×临用前准备三个PPC浓度。将肿瘤细胞浓度调整到104～105个/ml，在96孔平底培养板(100ml/孔)中加入不同浓度的化合物10μl每一个浓度设置3个平行孔，对照孔不加药。在37℃和5%湿化CO2培养箱中，冲击10min后，培养3天，加入MTT(5mg/ml)20μl继续培养4h的孔洞，采用快速翻板法〔8〕加入DMSO1000去除培养液和药液μl用酶标仪测量OD值/孔，冲击10min。(λ计算抑制率的490nm)。

　　抑制率=(1-对照孔平均吸收加药孔平均吸收)×当抑制率为100%时≥50%时，判断药物敏感性。

　　4.结果

　　(1)每孔(0.2)使用一个肿瘤细胞～1.1)×在105范围内，细胞数与MTT甲月赞化合物的比例正相关，不同肿瘤细胞产生的MTT甲月赞化合物数量差异较大。(2)合成化合物的体外肿瘤抑制率与细胞类型无关。(3)5种化合物A、B、C、D、E中，E的抑瘤率*大，平均达到77.1%(Hela、SGC-7910、8910、平均抑制率为8910PM和BGC-823)。化合物B的抑制率为*低，平均37.8%。